因此，为克服现有模型的不足，本研究首次采用人iPSC来源的肺类器官模型评估环磷酰胺的肺毒性作用。首先，本研究参照Hans团队所建立的方法进行肺类器官的诱导分化。与其他方法相比，该方法能够同时表达气道和肺泡标志物，从而更全面地模拟人类肺组织的复杂结构与功能。已有文献报道，此类肺类器官模型可成功模拟肺纤维化等疾病进程，进一步验证了其在病理研究中的适用性。在此基础上，本研究将肺类器官暴露于不同浓度的环磷酰胺中，成功构建了体外药源性肺损伤模型。
 

结果显示，环磷酰胺可呈浓度和时间依赖性地诱导肺类器官形态破坏。在10mmol/L环磷酰胺处理48h后，DNA损伤标志基因CDKN1A表达显著上调，流式细胞术检测显示凋亡细胞比例明显增加，同时qRT-PCR检测肺泡标志物SFTPB与气道标志物MUC5AC的mRNA表达水平显著下降，表明环磷酰胺可诱导DNA损伤、细胞凋亡及上皮功能损害。进一步研究发现，环磷酰胺处理组中炎症基因IL1B和TNFA的转录水平显著上调，同时间充质标志基因PDGFRB表达增强。免疫荧光染色进一步证实，IL-1β和PDGFRB蛋白在类器官外周区域特异性聚集，提示环磷酰胺可能激活炎症反应并启动早期纤维化过程。这些结果不仅为环磷酰胺相关肺毒性的分子机制提供了新的体外研究证据，也充分证明了人源肺类器官模型在药物安全性评价中的应用潜力。
 

本研究仍存在一定的局限性。首先，尽管肺类器官能够模拟部分肺部生理与病理特征，但仍缺乏完整的免疫系统和血管网络，其在重现体内复杂的炎症反应和纤维化微环境方面仍存在不足。其次，本研究仅针对特定浓度和时间点下的环磷酰胺毒性效应进行了评估，未来需进一步开展剂量梯度与时间序列分析，以系统揭示环磷酰胺诱导肺损伤的动态演变过程。
 

出自《人源肺类器官模型在评估环磷酰胺肺毒性及其潜在机制中的应用》作者王一迪，李晓彤，朱恒。