问:什么是RT-qPCR检测?2023-07-03 10:33:33
答:收集正常培养、预处理的脐带间充质干细胞与脂肪间充质干细胞,加1mL的Trizol裂解细胞10min,再加200μL三氯甲烷冰浴10min,14000 r/min离心15min,吸取上清至新EP管,加1.5倍异丙醇颠倒混匀,室温静置10min,14000r/min离心15min,弃上清,加1mL的体积分数75%已醇,14000r/min离心15min,弃乙醇,14000r/min空离15min,晾干,加适量无菌无酶水,用分光光度计测量浓度后,取1μg的RNA建立反转录体系,按反转录试剂盒的条件将RNA反转录为cDNA,将得到的cDNA用实时荧光定量PCR试剂盒检测mRNA水平,每个样品设3个复孔。出自《低氧和氧化应激对不同来源间充质干细胞旁分泌的差异性影响》作者潘筱颖,许永德,刘志强。
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