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问:EMSCs怎样分离、培养及传代?2024-07-29 09:55:11

答:利用组织贴壁法分离获取EMSCs。4周龄100g左右SD大鼠麻醉处死后,用碘伏及乙醇进行鼻部消毒,避免消毒液净泡鼻中隔鼻黏膜;细致完整取出鼻中隔于PBS中充分清洗,从鼻中隔软骨上将全层鼻黏膜分离;充分清洗鼻黏膜3次至无血色;眼科剪剪成大小约1mm3组织碎块,并置入细胞培养皿内,加入4mL含1%双抗及体积分数10%胎牛血清的DMEM/F-12培养基;培养皿静置在37℃、体积分数5%CO2培养箱内,每隔2d半量换液,除此期间禁触碰培养皿;当细胞生长融合至培养皿底80%时,将其标记为第1代并消化传代。取第3代对数生长期的细胞用于实验,接种于24孔板或6孔板。

出自《外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡促进神经元轴突的伸长》作者:孙海涛,任春朋,杨永涛.