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喉返神经和中枢神经系统的应用2022-01-04 09:08:07


基因治疗的靶点包括喉返神经和中枢神经系统,携带治疗基因的病毒载体可通过注射进入喉返神经中再传递至中枢神经,目前基因治疗常用载体是AAV,该载体在目前所发现的载体中安全性最好。Rubin等向喉返神经注射重组AAV扩散报告基因,并在大鼠脑干内成功检测到表达基因;此外原位杂交实验显示,大鼠脑干内存在病毒DNA,说明病毒和转基因产物均可在中枢神经系统内逆突触运输。有研究将腺病毒用于神经系统的基因治疗,但有部分学者认为腺病毒具有毒性会产生免疫反应而不推荐用作载体。 此外,Rubin等研究发现,将AdV注射到喉返神经中不会造成明显的额外神经元损伤,注射后1周在大脑疑核检测到转入基因的表达;Araki等在同一模型中验证了基因通过逆向转运在大脑中表达。

喉肌和声带黏膜喉肌和声带黏膜是基因治疗的另外两个靶点,将治疗基因导入喉肌,可产生肌营养和神经营养作用,防止喉返神经损伤后肌肉萎缩,并可以保护运动终板。 有研究利用高水平的肌肉特异性基因表达载体将报告基因和治疗基因[胰岛素样生长因子1导入大鼠的瘫痪喉肌,经逆转录聚合酶链反应检测发现,治疗组81.3%的大鼠在注射4周后检测到治疗基因编码的mRNA,说明治疗基因通过喉肌运输成功,单次、延迟注射运载体可能产生更好的神经恢复效果。此外,电穿孔基因即质粒传递,也可作为一种新的喉肌基因转导方法,并且该方法具有转染率高、组织损伤小的优点。

仙台病毒是副黏病毒家族的一员,是一种具有非片段,负义RNA基因组的包膜病毒,仙台病毒载体具有对人无致病性、能有效地感染气道上皮细胞的特点,仙台病毒载体可以携带至少5000个碱基量的基因,并且仅需小于5min的载体细胞接触时间就能将基因导入细胞。 Mizokami等研究了仙台病毒载体对喉肌和气管上皮的转导作用,发现在正常气管上皮中,喷雾吸入法优于注射法,前者报告基因的表达更加显著且持久,吸入法的发现为基因转导提供了一条新的途径。

出自《喉返神经损伤基因治疗的研究进展》作者李浩,代文杰。