为了改善诱导和维持8CLCs的培养体系,通过对信号通路和表观遗传通路调控因子的筛选, 得到4种小分子加1种细胞因子的组合, 其能够将hPSCs转变为8CLCs, 并且在这种条件下,8CLCs能够长期培养并维持全能性.通过与发育各阶段的胚胎细胞、多能性细胞和全能性细胞的转录组、表观遗传组和分化发育潜能的比较分析,可以鉴定8CLCs的全能性特征,发现8CLCs更类似于人类八细胞阶段胚胎细胞的分子特征. 能够被诱导为TSCs,并进一步分化为合体滋养层细胞和绒毛膜外滋养层细胞. 8CLCs也被用于构建人类的类囊胚（效率28％~58％）, 获得的类囊胚含有液腔和明显分界的内部及外部细胞, 转录组数据分析也显示其含有的3个细胞亚群与受精囊胚的3个谱系具有相似的表达模式, 提示构建的类囊胚能够作为模拟早期人类胚胎发育的体外模型.
 

同时,两个研究团队也发现在人naive PSCs中存在极少数量的8CLCs,分析发现这些8CLCs不仅上调合子基因组激活的标志基因,如ZSCAN4和LEUTX以及一些在合子基因组激活时高度开放的模体结合基因——DUX4、DUXA和KLF17,而且八细胞阶段胚胎细胞特有表达的转座元件HERV也高度表达.通过基因编辑技术过表达DUX4,或者使用广谱剪接体抑制剂处理人naive PSCs,可以提高合子基因组激活基因的表达水平, 提示基因编辑和化学小分子处理都可以用于提高8CLCs的比例,并揭示合子基因组激活的分子机制.而另外一个研究通过分析早期人类胚胎的单细胞转录组数据, 确认LEUTX可以作为8CLCs的标志基因,并且通过对信号通路和表观遗传发挥调控作用的化学小分子筛选, 建立了高比例分化8CLCs且能稳定培养的体系,获得了化学诱导的8CLCs。
 

出自《源于干细胞的囊胚样结构: 研究现状与展望》作者罗宇欣,戚亚男, 于洋。