问：免疫荧光染色是怎样？2023-07-10 09:25:56
答：为检测JBMMSCs经低氧处理后，Hif-1α（或Ki67）的表达情况。将细胞爬片置于紫外灯下照射1h，随后将爬片放入24孔板内，以3×104/孔的浓度重悬细胞，随机分为低氧及常氧（对照）组，每组设3个复孔，孵箱中孵育30min；待细胞生长汇合至80-90％，吸出原培养基，低氧组换低氧培养基，常氧组更换α-MEM完全培养基，分别培养48h；48h后将细胞爬片取出，PBS洗涤3次，4％的甲醛固定20min；室温下用含0.1％TritonX-100的透膜液透膜30min；洗涤后，山羊血清封闭1h，加一抗Hif-1α或Ki67（稀释比1∶200）4℃孵育过夜；次日封闭液洗涤5次，加入绿色荧光二抗孵育1h；封闭液洗涤5次，DAPI复染细胞核；抗荧光淬灭的封片剂封片，在激光扫描共聚焦显微镜下观察荧光显色情况。出自《低氧条件下颌骨骨髓间充质干细胞生物学活性及长链非编码RNAs表达谱差异的分析》作者王振宁，江小霞，张宇。
上一篇： 问：细胞划痕迁移实验是怎样的呢？
下一篇： 问：LncRNA测序数据分析是什么？
